(Kaip patikimas tiekėjas HANGZHOU JECI BIOCHEM siūlo stabilią -gamybą, aukštos- kokybės NAD (nikotinamido adenino dinukleotidą, CAS 53-84-9), tiekia patikimą žaliavų palaikymą IVD ir metabolizmo tyrimų programoms. Dėl mūsų nuoseklios produkcijos ir griežtos kokybės kontrolės esame tinkamiausias diagnostikos{6}}NAD tiekimo partneris.)
NAD (nikotinamido adenino dinukleotidas) yra svarbus kofermentas, natūraliai esantis ląstelėse, egzistuojantis dviem formomis: oksiduota forma (NAD⁺) ir redukuota forma (NADH). Jis gali būti konvertuojamas per redokso reakcijas, reguliuojant įvairius biologinius procesus, tokius kaip ląstelių energijos apykaita ir signalo perdavimas. NAD dalyvauja pagrindinėse fermentinėse reakcijose, kad užfiksuotų metabolitų pokyčius, o NAD ir NADH lygių ir jų santykių anomalijos yra glaudžiai susijusios su daugelio ligų atsiradimu ir vystymusi. Todėl jis tapo svarbiu žymekliu atliekant klinikinius biocheminius tyrimus ir ankstyvą ligų atranką. Aukšto-grynumo ir aukšto{5}}stabilumo diagnostikos-klasės NAD produktai, kaip pagrindinės žaliavos in vitro diagnostiniams reagentams (IVD) ir medžiagų apykaitos tyrimų rinkiniams, atlieka pagrindinį vaidmenį gerinant aptikimo jautrumą ir rezultatų patikimumą.
Diagnostikos{0}}laipsnio NAD kūrimo istorija
1906 m. Arthuras Hardenas atrado „paslaptingą kofermento faktorių“, kuris skatina medžiagų apykaitą, tyrinėdamas mielių alkoholio fermentaciją (vėliau įrodyta, kad tai NAD).
1929 m. Hansas von Euleris{1}}Chelpinas nustatė NAD dinukleotidinę struktūrą.
1930 m. Otto Warburgas išaiškino redokso mechanizmą tarp NAD ir NADH, paaiškindamas, kad NADH pasižymi būdinga ultravioletinių spindulių absorbcija esant 340 nm, o NAD neturi absorbcijos šiuo bangos ilgiu, o tai padėjo teorinį pagrindą fermentiniams tyrimams.
1948 m. Horecker ir kt. patvirtino molinį NADH ekstinkcijos koeficientą esant 340 nm, leidžiantį tiesiogiai kiekybiškai įvertinti fermentų reakcijos greitį per absorbcijos pokyčius [1].
1961 m. Oliveris H. Lowry sukūrė NAD(P)/H ciklo metodą, novatorišką audinių/ląstelių NAD(P)/H kiekybinę analizę.
1962–1963 m. „Boehringer Mannheim“ (vėliau įsigijo „Roche“) išleido reagentų rinkinį, pagrįstą NADH 340 nm absorbcijos nustatymu laktatdehidrogenazei (LDH), todėl pirmą kartą komerciškai buvo pritaikytas diagnostinės -klasės NAD kaip kofermento žaliava.
1973 metais Bernofsky ir kt. nustatė ADH-PES-MTT stiprinimo sistemos principą (ADH-PES-MTT kolorimetrinė sistema) [2];同年, Kato ir kt. (Lowry Laboratory) sukūrė ADH-MDH dvigubo-fermentų ciklo metodą, leidžiantį labai jautriai aptikti NAD/NADH [3].
Nuo tada diagnostikos{0}}klasės NAD tapo pagrindine įprastinių biocheminių tyrimų žaliava ir nuolat plečiasi į pažangiausias sritis, pvz., neurodegeneracinių ligų biomarkerių tyrimus, naviko metabolizmo stebėjimą ir senėjimo vertinimą.
Diagnostikos - lygio NAD taikymo scenarijai
Pagrindinės žaliavos klinikinei biocheminei diagnostikai
① Laktato dehidrogenazės (LDH) aptikimas
Aptikimo principas:
Laktatas+NAD+⟶LDHPiruvatas+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Kardiologijos skyrius (ūmaus miokardo infarkto diagnostika), Klinikinė laboratorija (hemolizinės anemijos diagnostika), Hepatologijos (kepenų ląstelių pažeidimo vertinimas) ir kt.
Normalus LDH diapazonas: 140 - 280 U/L (suaugusiesiems, skiriasi metodai)
Klinikinė reikšmė: > 280 V/L (nurodo audinių (kepenų, širdies, inkstų, raumenų, plaučių ir kt.) pažeidimą), > 500 V/L (dažniausiai pastebimas sergant miokardo infarktu, hemolizine anemija, piktybiniais navikais, sunkiomis infekcijomis).
② Malato dehidrogenazės (MDH) aptikimas
Aptikimo principas:
Obuolių rūgštis+NAD+⟶MDHoksaloacto rūgštis+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Klinikiniai reagentai (mitochondrijų ligų diagnostika), Mokslinių tyrimų sritis (mitochondrijų funkcijų tyrimai) ir kt.
Normalus MDH diapazonas: 12.5 - 50 U/L (skirtingose laboratorijose yra nedidelių skirtumų dėl aptikimo metodų ir reagentų)
Klinikinė reikšmė: pakilimas rodo mitochondrijų pažeidimą, audinių nekrozę ir kt.
③ Izocitrato dehidrogenazės (ICDH) aptikimas
Aptikimo principas:
Izocito rūgštis+NAD+⟶ICDH -Ketoglutaro rūgštis+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Klinikinė mitochondrijų ligų diagnostika, Mokslinių tyrimų sritis (kepenų pažeidimo vertinimas, energijos apykaitos tyrimai) ir kt.
Normalus ICDH diapazonas: 1 - 5 U/L (serumas)
Klinikinė reikšmė: pakilimas rodo mitochondrijų pažeidimą, hepatocitų pažeidimą, audinių nekrozę ir kt.
④Kreatino kinazės (CK) aptikimas
Aptikimo principas:
Fosfokreatinas+ADPGgliukozė+ATPG-6-P+NAD+⟶CKKreatinas+ATP⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Taikymo scenarijai: Kardiologijos skyrius (ūminis miokardo infarktas, miokarditas), Ortopedijos/Skubiosios pagalbos skyrius (raumenų pažeidimas, rabdomiolizė), Neurologijos (miopatija) ir kt.
Normalus CK diapazonas: vyrai 38 - 174 U/L; Moterys 26 - 140 U/L (metodų skirtumai)
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis rodo miokardo ar griaučių raumenų pažeidimą, dažniausiai pastebimą miokardo infarkto, miokardito, rabdomiolizės, sunkaus fizinio krūvio ir kt.
⑤ Gliukozės aptikimas
Aptikimo principas:
Gliukozė+ATPG-6-P+NAD+⟶HKG-6-P+ADP⟶G6PDH6PG+NADH
Taikymo scenarijai: Endokrinologija (diabeto diagnostika ir gliukozės kiekio kraujyje stebėjimas), Skubios pagalbos skyrius (hipoglikeminė koma, skubi hiperglikeminė diagnostika), Kritinės priežiūros medicina (ICU pacientų gliukozės kiekio kraujyje stebėjimas) ir kt.
Normalus gliukozės kiekis: nevalgius 3.9 - 6.1 mmol/L; 2 valandos po valgio < 7,8 mmol/l
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis stebimas sergant cukriniu diabetu, streso hiperglikemija; Sumažėjęs lygis pastebimas sergant hipoglikemija, insulinoma, sunkia kepenų liga ir kt.
⑥ Laktato aptikimas
Aptikimo principas:
Laktatas+NAD+⟶LDHPiruvatas+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Skubios pagalbos skyrius (šoko / audinių hipoksijos įvertinimas), ICU (po - kritinių pacientų gelbėjimo sprendimas), Kardiologijos skyrius (širdies nepakankamumas), Infekcinių ligų (sepsis), sporto medicina (sportininkų fizinio pajėgumo įvertinimas) ir kt.
Normalus laktato diapazonas: 0.5 - 2.2 mmol/L (veninis kraujas)
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑦ Galaktozės aptikimas
Aptikimo principas:
-D-Galaktozė+NAD+⟶GalDHGalaktono rūgštis+NADH+H+
Taikymo scenarijai: naujagimių patikra (galaktozemijos diagnozė), pediatrija (įgimtos medžiagų apykaitos klaidos), gastroenterologija (laktozės netoleravimo nustatymas), hepatologija (kepenų funkcijos įvertinimas) ir kt.
Normalus galaktozės diapazonas: Serumas nevalgius: < 0,28 mmol/L; Naujagimiams: < 1,11 mmol/l
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis pastebimas sergant galaktozemija, kepenų nepakankamumu, įgimtu galaktozės metabolinio fermento trūkumu ir kt.
⑧ Etanolio aptikimas
Aptikimo principas:
Etanolis+NAD+⟶ADHacetaldehidas+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Skubios pagalbos skyrius (ūmaus apsinuodijimo alkoholiu diagnostika), Fizinės apžiūros centras (Vairuotojo alkoholio tyrimas), Teismo ekspertizė (alkoholio koncentracijos kraujyje matavimas) ir kt.
Normalus etanolio diapazonas: 0 mmol/L (negeriantiems)
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis rodo alkoholio vartojimą arba apsinuodijimą alkoholiu; per didelės koncentracijos gali sukelti centrinės nervų sistemos slopinimą, kvėpavimo ir kraujotakos slopinimą.
⑨ -Hidroksibutirato aptikimas
Aptikimo principas:
-Hidroksisviesto rūgštis+NAD+⟶ -HBDHAcetoacto rūgštis+NADH+H+
Taikymo scenarijai: Endokrinologija (diabetinės ketoacidozės diagnozė), mityba (maisto kiekio stebėjimas) ir kt.
Normalus -hidroksibutirato diapazonas: Kraujas nevalgius: < 0,27 mmol/L (metodų skirtumai)
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis rodo diabetinę ketoacidozę, badą, ilgalaikį badavimą-, alkoholinę ketoacidozę ir kt.
以下是图片内容的英文翻译,严格保持原格式:
⑨ -Hidroksisviesto rūgšties aptikimas
Aptikimo principas:
-Hidroksisviesto rūgštis+NAD+⟶ -HBDHAcetoacto rūgštis+NADH+H+
Taikymo scenarijai: endokrinologija (diabetinės ketoacidozės diagnostika), mityba (dietos stebėjimas) ir kt.
Normalus -hidroksisviesto rūgšties diapazonas: Kraujas nevalgius: < 0,27 mmol/L (metodų skirtumai)
Klinikinė reikšmė: Padidėjęs lygis rodo diabetinę ketoacidozę, badą, ilgalaikį badavimą-, alkoholinę ketozę ir kt.
Biomarkeriai ligoms įvertinti
NAD, kaip ligos vertinimo biomarkeris, šiuo metu yra klinikinio vertimo stadijoje. 2022 m. NADMED Q-NADMED Blood NAD⁺/NADH aptikimo rinkinys tapo pirmuoju pasaulyje NAD aptikimo produktu, kuriam suteiktas CE-IVD sertifikatas (In vitro diagnostikos medicinos prietaisų direktyva). Jis nustato NAD⁺ ir NADH koncentracijas žmogaus visame kraujyje, o NAD⁺ aptikimo ribos: 330 nM; NADH: 119 nM. NAD⁺ koncentracija sveikų suaugusiųjų visame kraujyje yra maždaug 18 μM (diapazonas: 15–23 μM) [4], naudojama kiekybiniam viso kraujo nustatymui ir NAD pirmtakų terapinio poveikio stebėjimui. Tačiau jis dar nebuvo patvirtintas kaip nepriklausomas ligų diagnostikos kriterijus.
Mokslinių tyrimų srityje giliai tiriama galima NAD/NADH santykio reikšmė smegenų skystyje ar kraujyje sergant neurodegeneracinėmis ligomis (pvz., Alzheimerio liga, Parkinsono liga), naviko metabolizmu ir senėjimo vertinimu [5−8], tačiau šiuo metu jis daugiausia taikomas klinikiniams tyrimams ir moksliniams tyrimams, o ne įprastinei klinikinei diagnostikai.
>Diagnostikos{0}}laipsnio NAD rinkos kraštovaizdis<
Šiuo metu pasaulinė diagnostikos{0}}NAD rinka sparčiai vystosi, o tai lemia technologijų ir paklausos augimas. Pramonė sparčiai pereina nuo importo-prie vietinio pakeitimo. In vitro diagnostikos sritis rodo struktūrinę diferenciaciją: nors bendras reagentų rinkinių skaičius sumažėjo, pirmaujančios įmonės (pvz., Roche Diagnostics, Mindray Medical) išlieka stabilios ir plečiasi į naujus projektus, tokius kaip medžiagų apykaitos tyrimai ir senėjimo vertinimas, o mažos ir vidutinės įmonės mažina gamybos linijas dėl spaudimo pelnui.
Pagrindiniai diagnostikos{0}}klasės NAD tiekėjai: „Roche“, „Oriental Yeast“, „SunClone Bio“, „Shenzhen Bangtai“ ir kt.
Nuorodos
[1] HORECKER BL, KORNBERG A. Redukuotos piridino nukleotidų juostos ekstinkcijos koeficientai[J]. J Biol Chem, 1948, 175(1): 385 - 90.
[2] BENFORSKY C, SWAN M. Patobulintas nikotinamido adenino dinukleotido [J] ciklo tyrimas. Anal Biochem, 1973, 53(2): 452 - 8.
[3] KATO T, BERNTSEN O, CARTER S ir kt. Nikotinamido - adenino dinukleotido fermentinio ciklo metodas su obuolių ir alkoholio dehidrogenazėmis [J]. Anal Biochem, 1973, 56(2): 392 - 8.
[4] NATALIJA V Balšova, Levas G. Zavileyskis, Artemas V Artukhovas ir kt. Veiksmingas tyrimas ir NAD⁺ žymenų reikšmė žmogaus kraujyje [J]. Front Med, 2022, 9, 886645.
[5] LAN Z P. Nauja biologinių žymenų aptikimo sistema ir jos taikymas Kinijoje [patentas]. Kinija, 119560018A[P]. 2024 - 11 - 12.
[6] YAN L, SUN MR, WU J ir kt. Fluorescencinio zondo tipas pirimidino nukleozidams aptikti ir jo paruošimo būdas bei taikymas: Kinija, 117887460A[P]. 2025 - 09 - 02.
[7] JIN LP, ZHAO X, LU Y ir kt. Nikotinamido adenino dinukleotido ir jo metabolitų chromogeninis nustatymas naudojant piridino nukleozidus kaip kofaktorius ir jo taikymas diagnozuojant arba gydant fermentacinius skysčius[J]. Kinija, 112694070A[P]. 2023 - 12 - 22.
[8] HONG J, HAN ZW, NING XQ ir kt. NAD⁺ taikymas kaip molekulinis žymeklis kuriant produktus, skirtus moterų lytinių organų diskomfortui diagnozuoti [J]. Kinija, 118109777A[P]. 2024 - 05 - 10.
